Colorações especiais: PAS
O Ácido Periódico de Schiff (PAS) é utilizado na rotina para identificação de substâncias formadas por carboidratos (glicogênio, manose, frutose, glicose, galactose) corando estruturas como membrana basal e microrganismos. No caso de fungos cora os polissacarídeos da parede celular. O que ocorre é a oxidação seletiva de glicois vicinais presentes na glicose que produz aldeídos, estes por fim, reagem com o reagente de Schiff produzindo uma substância de cor magenta. A coloração pode ser feita com ou sem o uso da diástase. A diástase nada mais é que a adição da saliva do operador na lâmina e sua colocação em uma estufa por alguns minutos antecedendo a técnica de coloração. A utilização da diástase serve para confirmar a existência de material PAS-positivo. Na rotina do LABOPAVE essa coloração é principalmente utilizada para identificação de fungos, onde é possível visualizar suas hifas, e tumores de glândulas produtores de mucinas.
The Periodic Acid-Schiff Stain is used on the routine to identify substances formed by carbohydrates like structures (glycogen, mannose, fructose, glucose, galactose) as the basement membrane and microorganisms. In fungi, stains the polysaccharide components of the fungal cell wall. What occurs is the selective oxidation of vicinal glycols present in the glucose that produces aldehydes, which ultimately react with Schiff’s reagent to produce a magenta colored substance. Staining can be done with or without the use of diastasis. Diastasis is nothing more than adding the operator’s saliva to the slide and placing it in a greenhouse for a few minutes prior to the staining technique. The use of diastasis serves to confirm the existence of PAS-positive materialAt the LABOPAVE this stain is mainly used to identify fungi, where it is possible to see the hyphae, and in tumors of mucin-producing glands.
Photos:
2 and 3- Small intestine, signet ring cell adenocarcinoma, canine, male, SRD, 13 years 9 months, HE. Lump in the intestine wall with large amounts of epithelial cells arranged in acini. In the midst of neoplastic cells, there are extensive areas of connective tissue proliferation (fibroplasia).
4- Small intestine, signet ring cell adenocarcinoma, canine, male, SRD, 13 years 9 months, HE. Observe the acini with epithelial cells containing intense pleomorphism, vesicular nuclei with evident nucleolus, ranging from elongated polygons with sparse and eosinophilic cytoplasm, many with large vacuoles that move the nucleus to the periphery (signet cell, red arrow).
5 and 6- Small intestine, signet ring cell adenocarcinoma, canine, male, SRD, 13 years 9 months, PAS. In the midst of the neoplasm there are acinos that contain cellular debris interspersed with amorphous material with eosinophilic and other slightly basophilic areas, positive in the coloring of PAS (mucins).
7- Small intestine, canine, male, SRD, 13 years and 9 months, SBP. Part of the organ not affected by the neoplasm, showing villi with goblet cells strongly marked by PAS due to the presence of mucins.
8-Species of fungi stained with PAS
9-Staining protocol used at LABOPAVE.
RODRIGUES, João. Técnicas de Coloração – Laboratório Online. Disponível em: <https://www.fciencias.com/2014/06/26/tecnicas-de-coloracao/>. Acesso em: 27 nov. 2019.
FONTE: KUMAR, G.L. & KIERNAN, J.A. Education Guide: Special Stains and H&E. Ed 2. Carpinteria, 2010.
2- Intestino delgado, adenocarcinoma de células em anel de sinete, canino, macho, SRD, 13 anos 9 meses, HE. Nódulo na parede com grande quantidade de células epiteliais arranjadas em ácinos. Em meio às células neoplásicas há extensas áreas de proliferação de tecido conjuntivo (fibroplasia).
3- Intestino delgado, adenocarcinoma de células em anel de sinete, canino, macho, SRD, 13 anos 9 meses, HE. Nódulo na parede com grande quantidade de células epiteliais arranjadas em ácinos. Em meio às células neoplásicas há extensas áreas de proliferação de tecido conjuntivo (fibroplasia).
4- Intestino delgado, adenocarcinoma de células em anel de sinete, canino, macho, SRD, 13 anos 9 meses, HE. Observar os ácinos com células epiteliais contendo intenso pleomorfismo, núcleos vesiculosos com nucléolo evidente, variando de alongadas a poligonais com citoplasma escasso e eosinofílico, muitas apresentando grandes vacúolos que deslocam o núcleo para a periferia (célula em anel de sinete, seta vermelha).
5- Intestino delgado, adenocarcinoma de células em anel de sinete, canino, macho, SRD, 13 anos 9 meses, PAS. Em meio ao neoplasma há ácinos que contém restos celulares entremeados a material amorfo com áreas eosinofílicas e outras levemente basofílicas, positivas na coloração de PAS (mucinas).
6- Intestino delgado, adenocarcinoma de células em anel de sinete, canino, macho, SRD, 13 anos 9 meses, PAS. Em meio ao neoplasma há ácinos que contém restos celulares entremeados a material amorfo com áreas eosinofílicas e outras levemente basofílicas, positivas na coloração de PAS (mucinas).
7- Intestino delgado, canino, macho, SRD, 13 anos e 9 meses, PAS. Parte do órgão não acometida pelo neoplasma, evidenciando as vilosidades com as células caliciformes marcadas fortemente pelo PAS devido a presença de mucinas.
8-Espécies de fungos corados com PAS
9-Protocolo de coloração utilizado no LABOPAVE.
